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進來輕松學會使用Dionex耗材
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更新時間:2019-10-08
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進來輕松學會使用Dionex耗材
制備的樣品在樣品瓶中混合不均勻或每次取樣時注射器對樣品產生玷污以及樣品揮發等都會影響出峰靈敏度的重復性。定量不重復由上述三種原因引起的可能性很大,而且都和進樣操作密切相關,因此可一起進行檢查。只有在上述檢查后無異常發現時才轉入接下的Dionex耗材使用步驟。
Dionex耗材操作過程中需要注意的知識點:
1、避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。溫度的突然變化或者使Dionex耗材從高處掉下都會影響柱內的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內填料,因此在調節流速時應該緩慢進行,在閥進樣時閥的轉動不能過緩。
2、應逐漸改變溶劑的組成,特別是反相色譜中,不應直接從有機溶劑改變為全部是水,反之亦然。
3、一般說來Dionex耗材不能反沖,只有生產者指明該柱可以反沖時,才可以反沖除去留在柱頭的雜質。否則反沖會迅速降低柱效。
4、選擇使用適宜的流動相,以避免固定相被破壞。有時可以在進樣器前面連接一預柱,Dionex耗材是鍵合硅膠時,預柱為硅膠,可使流動相在進入Dionex耗材之前預先被硅膠“飽和”,避免Dionex耗材中的硅膠基質被溶解。
5、避免將基質復雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內,需要對樣品進行預處理或者在進樣器和Dionex耗材之間連接一保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應該經常更換。
6、經常用強溶劑沖洗Dionex耗材,清除保留在柱內的雜質。在進行清洗時,對流路系統中流動相的置換應以相混溶的溶劑逐漸過渡,每種流動相的體積應是柱體積的20倍左右,即常規分析需要50-75ml。